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详细内容

細胞復(fù)蘇、傳代和凍存


服務(wù)簡介:

永生性的細胞可以無限制的生長,當(dāng)生長一定數(shù)量之后,由于空間的限制和接觸性抑制,細胞不再生長,甚至可能死亡,因此細胞需要減少密度,以至于細胞得以生長和存活。對于細胞保存,我們將細胞保存在液氮罐中,使用細胞時,需要將細胞復(fù)蘇。


技術(shù)原理:

細胞復(fù)蘇:從液氮中取出凍存管,于37℃水浴鍋中至冰晶溶解,凍存管中的液體轉(zhuǎn)移至離心管,離心后,棄上清,加入完全培養(yǎng)基吹打混勻后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶,于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

細胞傳代:PBS清洗,胰蛋白酶消化,完全培養(yǎng)基終止消化,離心機離心,留1/3的細胞混合液轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶內(nèi),于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)

細胞凍存:重懸得到細胞液,取1.5ml重懸細胞液,加入10%細胞級DMSO,放入梯度凍存盒內(nèi),放置-80度冰箱,3天后,將凍存管移至液氮內(nèi)。




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